Маркеры гепатитов В и С — это специфические антигены и антитела, обнаружение которых в сыворотке крови является подтверждением диагноза. Антигены — это частицы цитоплазматической мембраны возбудителя (поверхностный антиген) или частицы оболочки нуклеокапсида (внутренний антиген). Вирусный гепатит, независимо от типа, инфицирует гепатоциты. Иммунная система здорового человека воспринимает пораженные клетки как генетически чужеродные, поэтому уничтожает их посредством выработки антител. Гибель клеток становится причиной развития воспалительного процесса.
Анализ крови на маркеры
Для подтверждения диагноза необходим целый ряд анализов, цель которых — выявление антигенов — частиц вирионов или антител, иммуноглобулинов плазмы крови. Позволяют обнаружить маркеры вирусных гепатитов В и С анализы методами ПЦР и ИФА.
Посредством иммуноферментного анализа обнаруживают антигены или антитела, а методом ПЦР определяют количество вируса, его активность, генотип.
Анализ крови на маркеры вирусных гепатитов можно сдавать не ранее чем через 8 часов после последнего приема пищи. Часто пациентов беспокоит вопрос, сколько ждать результаты анализов. На проведение ИФА необходимо от 1 до 10 дней. ПЦР может быть выполнена за несколько часов.
Поводом для проведения анализа на гепатит В и С является:
Подготовка к вакцинации или оценка эффективности вакцины.- Повышение уровня АлАт (аланинаминотрансферазы), АсАт (аспартат-аминотрансферазы). Эти ферменты — также маркеры вирусного гепатита, но с функциональной точки зрения. Они синтезируются клетками печени, но в плазме крови их количество увеличивается только после массовой гибели профильных клеток.
- Наличие клинических симптомов заболевания.
- Наличие у пациента хронического воспаления печени или заболеваний желчевыводящих путей.
- Сексуальный контакт с носителем инфекции.
- Парентеральные манипуляции в сомнительных условиях.
- Планирование или скрининг во время беременности.
- Подготовка к госпитализации.
- Обследование доноров.
- Обследование лиц из группы риска.
Маркеры HBV
Клетки вируса состоят из внешней мембраны, цитоплазмы и нуклеокапсида — ядра, заключенного в собственную оболочку. Ядро содержит ДНК возбудителя — носителя его генетической информации и фермент ДНК-полимеразу, необходимый для репликации вирионов.
Клетка возбудителя содержит следующие маркеры вирусного гепатита этого типа:
HBsAg (hepatitis B surface antigen). Этот комплекс протеинов клеточной оболочки возбудителя — определяющий фактор для постановки диагноза. Обнаружение в сыворотке крови антигена HBs является абсолютным подтверждением наличия вируса у пациента. Обнаружение этого вещества спустя 6 месяцев после заражения свидетельствует о хронической форме заболевания.- HBcorAg (HBV core antigen). Это протеины ядерной оболочки вириона, которые можно обнаружить только в гепатоцитах. А вот плазма крови пациента может содержать только антитела к этому антигену — anti-HBcorAg.
- HBeAg (hepatitis early/envelope antigen). Это ранний вирусный антиген, который обнаруживается на этапе активной репликации возбудителя.
- HBxAg — антиген, значение которого для жизнедеятельности вируса не определено, а потому для постановки диагноза он пока не учитывается.
Сдача анализа на гепатит B имеет целью подтверждение наличия возбудителя на основании обнаружения маркеров, определение стадии заболевания, кроме того, активности инфекционного агента.
О чем говорят маркеры
HBsAg необходим вирусу для формирования собственной оболочки. На начальном этапе заболевания он синтезируется с избытком, его количество даже превышает потребности возбудителя. Этот вирусный антиген был открыт первым, он является ведущим для постановки диагноза. Это вещество можно обнаружить с 1–10 недели после заражения, за 2–6 недель до появления первых клинических признаков воспаления печени. Этот вирусный маркер позволяет определить форму заболевания: если HBs-антиген остается в крови спустя 6 месяцев после инфицирования, это свидетельствует о хронической форме. В случае элиминации возбудителя и клинического выздоровления пациента антитела к этому антигену (anti-HBs или HBsAb) обнаруживают уже после исчезновения его самого.
Иногда при обследовании на маркеры гепатита HBs-антиген не обнаруживается. Это может свидетельствовать о том, что иммунная система уничтожает пораженные клетки быстрее, чем HBsAg успевает поступать в кровяное русло. В этом случае диагноз основывается на обнаружении HBcorAb IgM. Отсутствие HBs-антигена на фоне тяжелого острого течения болезни при подтверждении диагноза посредством присутствия в крови IgM обычно наблюдается у 20% пациентов и нередко заканчивается летальным исходом.
Поскольку вирусный антиген HBcor нельзя обнаружить в крови, маркерами его присутствия являются HBcor-антитела — иммуноглобулины класса М и G.
IgM является признаком острой стадии заболевания, которая продолжается не более 6 месяцев. Этот иммуноглобулин можно обнаружить уже с первых недель после заражения, затем он постепенно исчезает. У 20% инфицированных IgM обнаруживается на протяжении 2 лет. При хронической форме воспаления печени концентрация этого антитела незначительна.
IgG является признаком контакта с инфекционным агентом, он присутствует в сыворотке крови всю последующую жизнь человека, независимо от формы заболевания.
HBeAg является признаком репликации вирионов и высокой степени контагиозности носителя. Если в очередном результате анализа на гепатит В обнаружено исчезновение этого антигена, при этом регистрируется появление антител к нему, это является признаком ремиссии.
Наличие в анализе на гепатит В вирусного ДНК свидетельствует об острой форме болезни. На ранней стадии наличие этого маркера является основным признаком репликации HBV. Его обнаруживают с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции), суть которой состоит в многократном удвоении участка ДНК возбудителя при помощи специальных ферментов до получения количества материала, достаточного для детекции.
Копирование происходит только определенного участка генома. Такая точность позволяет обнаружить даже единичную молекулу ДНК в материале и установить присутствие вируса в доклинический период. Точность реакции составляет 98%. Метод применим для выявления генетического материала РНК-содержащих вирусов.
Расшифровка
Расшифровка анализов заключается в интерпретации результатов. Результат считается негативным, если маркеры в крови не обнаружены. Обнаружение HBsAg свидетельствует о наличии вируса у пациента, а наличие HBs-антител и IgG является признаком перенесенного заболевания или прививки.
Маркеры вирусного гепатита HBeAg, ДНК-полимеразы, собственно ДНК вируса и IgM — показатель активного размножения клеток возбудителя. Кроме того, HBe-антитела свидетельствуют о высокой концентрации возбудителя, контагиозности носителя инфекции, а также возможности перинатального заражения. Наличие HBe-антител является признаком законченной репликации вирионов.
Обычно рекомендуют сдавать кровь одновременно на три показателя: HBsAg, Anti-HBs, Anti-Hbcor. Эти вещества выявляют посредством ИФА. Методом ПЦР подтверждают наличие ДНК вируса, количество возбудителя, его генотип.
Маркеры HCV
Маркеры вирусного гепатита С — это антитела к вирусу и его РНК. В первую очередь для подтверждения присутствия возбудителя в организме необходимо сдать анализ на anti-HCV — суммарные антитела к вирусу гепатита С. Иммунологические исследования позволяют выявить маркеры возбудителя, которыми являются антитела классов М и G. Они вырабатываются в ответ на присутствие в крови у пациента структурных и неструктурных белковых частиц вирионов. IgM и G можно выявить на протяжении первых 14 дней болезни и после клинического выздоровления.
Обнаружение суммарных иммуноглобулинов может являться признаком как острого, так и хронического течения болезни. Для определения более точных сроков инфицирования, кроме того, формы заболевания необходимо сдать кровь на каждое из антител по отдельности. Случается, что иммунологические тесты выявляют иммуноглобулины только через несколько месяцев после проявления клинической картины воспаления печени.
Расшифровка результата иммунологического анализа:
- Отсутствие антител может свидетельствовать о том, что гепатит С у пациента не обнаружен, инкубационный период заболевания еще не закончен или речь идет о серонегативном варианте возбудителя.
- Обнаружение IgM является признаком активной репликации вируса и того, что гепатит С прогрессирует и находится в острой фазе.
- Наличие IgG — показатель присутствия возбудителя или контакта с ним в прошлом.
Иммуноглобулины присутствуют в крови реконвалесцентов до 10 лет, концентрация их при этом постепенно снижается.
Поскольку иммунологические тесты могут дать ложноотрицательный или ложноположительный результат, дополнительно выявляют такие маркеры вирусного гепатита С, как специфические IgG к антигенам вируса сore, NS1 NS2, NS3, NS4, NS5. Результат анализа считается позитивным, если обнаружены антитела к 2 или более антигенам этой группы.
Для определения генотипа возбудителя и его количества применяют полимеразную цепную реакцию. Это исследование позволяет выявить РНК на ранних этапах заболевания и даже в инкубационный период, когда серологические маркеры еще невозможно обнаружить. Для репликации используют стабильный участок генома вируса. Кроме того метод ПЦР позволяет определить количество копий вирусной РНК в единице объема крови (копии/мл или копии/ см3). Этот показатель используют для оценки эффективности противовирусной терапии. Кроме того, ПЦР позволяет определить серовариант возбудителя. ВОЗ рекомендует трижды проводить реакцию ПЦР для выявления РНК HVC для окончательного подтверждения диагноза.
Сверхчувствительность реакции ПЦР может стать причиной ложноположительного результата, поэтому для постановки заключительного диагноза необходим комплексный анализ показателей крови как серологических, так и биохимических, наблюдение за изменением этих показателей в динамике, кроме того, морфологическая оценка состояния пораженного органа.
